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- 2023-03-18 01:45:02 发布
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DNA 的粗提取与鉴定
教学目标：
1、知识与能力目标
理解 DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理，初步掌握 DNA的粗提取和鉴定方法，
理解相关溶液的作用机理，培养学生的分析能力，通过实验使学生能够简述科学探究的基本过程。
2、情感态度与价值目标
通过探索培养科学的怀疑精神和创新精神；通过实验结果，学生树立生命物质性的观点。
教学重点：提取 DNA的相关原理和步骤
教学难点：提取 DNA的相关原理和步骤
教学过程：
开门见山：
讲解本实验的目的是提取 DNA和 DNA的鉴定，其中提取 DNA是本实验的重点和难点。
提出问题：“DNA主要存在于什么结构上？”“如何提取 DNA？”“选什么材料好？”
达成共识：
1、造适宜材料：选动物细胞，易打破细胞结构
2、破坏细胞膜、核膜结构，得核物质。
3、将 DNA与蛋白质等物质分开，得 DNA
4、去掉 DNA中杂质，提纯 DNA。
探究实验原理：
屏幕展示表格 1
NaCl2mo1/L NaC10.14mo1/L NaC10.015mo1/L
DNA
蛋白质
表格 2
DNA 蛋白质 杂质
95%酒精
不同浓度的 NaC1溶液可溶解或析出 DNA。95%酒精可提取 DNA。
填表 1：
NaCl2mo1/L NaC10.4mo1/L NaC10.015mo1/L
DNA 最大 最小 变大
蛋白质 解聚 最大 变小
填表 2：
DNA 蛋白质 杂质
95%酒精 不溶 可溶 可溶
通过对实验原理的预习，表格的比较，使学生明确了各溶液的用途，保证理解实验。
请学生代表简述 DNA提取实验步骤
投影展示实验设计思路：
鸡血细胞液①aDNA 释放 ②bDNA与蛋白质的分离 ③cDNA析出④dDNA浓缩（提纯）
获得鸡血细胞核物质：提核物质→溶解→析出→溶解→析出
实验步骤：
引导学生讨论、回忆并回答目的①~⑨。
①防止血凝。
②加速血细胞破裂。
③溶解 DNA。
④使 2 mol/L的 NaCl溶液稀释至 0.14 mol/L，促 DNA最大限度地析出。
⑤使含 DNA的黏稠物被留在纱布上。
⑥使含 DNA的黏稠物尽可能多地溶于溶液中。
⑦除去含 DNA的滤液中的杂质。
⑧提取 DNA。
⑨A：出现蓝色。B：无变化
讨论与结论：
投影给出如下讨论提纲，供学生讨论。
（1）DNA粗提取过程中的关键是哪几步？
（2）提取鸡血中的DNA时，为什么要除去血液中的上清液？
（3）DNA的直径约为 2 nm，实验中出现的丝状物的粗细是否表示一个 DNA分子直径的大小？
学生分组进行讨论并发表讨论结果。教师对讨论进行全程指导，并与学生一起归纳总结。
（1）a．提取鸡血细胞的核物质。应用低渗原理和机械搅拌，可得到最大量的 DNA。
b．析出 DNA黏稠物。加蒸馏水要慢，搅拌要轻。
c．沉淀 DNA时，必须用冷酒精。
（2）提取 DNA，去除杂质是关键。由于上清液是血液中的血浆部分，不含 DNA，所以要除去（含蛋
白质）。
（3）实验中出现的丝状物是肉眼可以观察到的，这种丝状物的直径要比 DNA分子的直径 2 nm大许
多倍，所以实验中出现的丝状物并不表示一个 DNA分子的直径。
实验结论：细胞中有 DNA，DNA 遇二苯胺试剂在沸水浴中变蓝色。
教学目标巩固
1．实验中步骤 1和步骤 3都需要加入蒸馏水，两次加入的作用相同吗？为什么？
2．实验中 NaCl的物质的量浓度为 2 mol/L和 0.14 mol/L 对 DNA有何影响？
3．DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成 A．砖红色 B．橘黄色 C．紫色 D．蓝色
补充知识：
1、鉴定 DNA 的其他方法
用紫外灯照射法鉴定 DNA效果很好。具体鉴定方法如下。
1．配制染色剂。用蒸馏水配制万分之五的溴化乙锭（EB）溶液。
2．将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上，再滴一滴 EB溶液染色。
3．将蜡纸放在紫外灯（260 nm）下照射（暗室中），可见橙红色的萤光（DNA的紫外吸收高峰在 280
nm处）。
2、DNA 粗提取与鉴定的另一种方法
1．材料用具
新鲜菜花（或蒜黄、菠菜）。
塑料烧杯，量筒，玻璃棒，尼龙纱布，陶瓷研钵，试管，试管架，试管夹，漏斗，酒精灯，石棉网，
三角架，火柴，刀片，天平。
研磨液，体积分数为 95%的酒精溶液，二苯胺试剂，蒸馏水。
2．方法步骤
A．DNA的粗提取
（1）准备材料：将新鲜菜花和体积分数为 95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室，至少 24小时。
（2）取材：称取 30 g...
教学目标：
1、知识与能力目标
理解 DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理，初步掌握 DNA的粗提取和鉴定方法，
理解相关溶液的作用机理，培养学生的分析能力，通过实验使学生能够简述科学探究的基本过程。
2、情感态度与价值目标
通过探索培养科学的怀疑精神和创新精神；通过实验结果，学生树立生命物质性的观点。
教学重点：提取 DNA的相关原理和步骤
教学难点：提取 DNA的相关原理和步骤
教学过程：
开门见山：
讲解本实验的目的是提取 DNA和 DNA的鉴定，其中提取 DNA是本实验的重点和难点。
提出问题：“DNA主要存在于什么结构上？”“如何提取 DNA？”“选什么材料好？”
达成共识：
1、造适宜材料：选动物细胞，易打破细胞结构
2、破坏细胞膜、核膜结构，得核物质。
3、将 DNA与蛋白质等物质分开，得 DNA
4、去掉 DNA中杂质，提纯 DNA。
探究实验原理：
屏幕展示表格 1
NaCl2mo1/L NaC10.14mo1/L NaC10.015mo1/L
DNA
蛋白质
表格 2
DNA 蛋白质 杂质
95%酒精
不同浓度的 NaC1溶液可溶解或析出 DNA。95%酒精可提取 DNA。
填表 1：
NaCl2mo1/L NaC10.4mo1/L NaC10.015mo1/L
DNA 最大 最小 变大
蛋白质 解聚 最大 变小
填表 2：
DNA 蛋白质 杂质
95%酒精 不溶 可溶 可溶
通过对实验原理的预习，表格的比较，使学生明确了各溶液的用途，保证理解实验。
请学生代表简述 DNA提取实验步骤
投影展示实验设计思路：
鸡血细胞液①aDNA 释放 ②bDNA与蛋白质的分离 ③cDNA析出④dDNA浓缩（提纯）
获得鸡血细胞核物质：提核物质→溶解→析出→溶解→析出
实验步骤：
引导学生讨论、回忆并回答目的①~⑨。
①防止血凝。
②加速血细胞破裂。
③溶解 DNA。
④使 2 mol/L的 NaCl溶液稀释至 0.14 mol/L，促 DNA最大限度地析出。
⑤使含 DNA的黏稠物被留在纱布上。
⑥使含 DNA的黏稠物尽可能多地溶于溶液中。
⑦除去含 DNA的滤液中的杂质。
⑧提取 DNA。
⑨A：出现蓝色。B：无变化
讨论与结论：
投影给出如下讨论提纲，供学生讨论。
（1）DNA粗提取过程中的关键是哪几步？
（2）提取鸡血中的DNA时，为什么要除去血液中的上清液？
（3）DNA的直径约为 2 nm，实验中出现的丝状物的粗细是否表示一个 DNA分子直径的大小？
学生分组进行讨论并发表讨论结果。教师对讨论进行全程指导，并与学生一起归纳总结。
（1）a．提取鸡血细胞的核物质。应用低渗原理和机械搅拌，可得到最大量的 DNA。
b．析出 DNA黏稠物。加蒸馏水要慢，搅拌要轻。
c．沉淀 DNA时，必须用冷酒精。
（2）提取 DNA，去除杂质是关键。由于上清液是血液中的血浆部分，不含 DNA，所以要除去（含蛋
白质）。
（3）实验中出现的丝状物是肉眼可以观察到的，这种丝状物的直径要比 DNA分子的直径 2 nm大许
多倍，所以实验中出现的丝状物并不表示一个 DNA分子的直径。
实验结论：细胞中有 DNA，DNA 遇二苯胺试剂在沸水浴中变蓝色。
教学目标巩固
1．实验中步骤 1和步骤 3都需要加入蒸馏水，两次加入的作用相同吗？为什么？
2．实验中 NaCl的物质的量浓度为 2 mol/L和 0.14 mol/L 对 DNA有何影响？
3．DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成 A．砖红色 B．橘黄色 C．紫色 D．蓝色
补充知识：
1、鉴定 DNA 的其他方法
用紫外灯照射法鉴定 DNA效果很好。具体鉴定方法如下。
1．配制染色剂。用蒸馏水配制万分之五的溴化乙锭（EB）溶液。
2．将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上，再滴一滴 EB溶液染色。
3．将蜡纸放在紫外灯（260 nm）下照射（暗室中），可见橙红色的萤光（DNA的紫外吸收高峰在 280
nm处）。
2、DNA 粗提取与鉴定的另一种方法
1．材料用具
新鲜菜花（或蒜黄、菠菜）。
塑料烧杯，量筒，玻璃棒，尼龙纱布，陶瓷研钵，试管，试管架，试管夹，漏斗，酒精灯，石棉网，
三角架，火柴，刀片，天平。
研磨液，体积分数为 95%的酒精溶液，二苯胺试剂，蒸馏水。
2．方法步骤
A．DNA的粗提取
（1）准备材料：将新鲜菜花和体积分数为 95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室，至少 24小时。
（2）取材：称取 30 g...