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- 2023-03-16 07:40:01 发布
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课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
知识点一 菌株的筛选与选择培养基
1．筛选菌株
(1)原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、
pH 等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
(2)实例：从热泉中筛选出 Taq 细菌。热泉 70～80 ℃的高温条
件淘汰了绝大多数微生物，而使耐热的 Taq 细菌脱颖而出。
(3)方法：利用选择培养基分离。
归纳总结：选择培养微生物的方法通常有两种：(1)可利用该分离
对象对某一营养物质有“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养
物质，从而使它成为一种加富培养基；(2)可利用该分离对象对某种抑
菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑菌物质，经培养后，其他微
生物生长受抑制，而分离对象却可乘机大大繁殖，在数量上占优势。
2．选择培养基
(1)概念：选择培养基指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或
阻止其他种类微生物生长的培养基。
(2)选择培养基的制备原理：根据不同微生物的特殊营养要求或其
对某一化学、物理因素的抗性不同而制备培养基。
(3)选择培养基的制备方法：在培养基中加入某种允许特定种类微
生物生长，抑制或阻止其他种类微生物生长的化学成分。
(4)选择培养基的用途：使混合菌株中的目的菌变成优势菌，提高
该菌的筛选率。
(5)实例：在培养基中以尿素为唯一的氮源可得到能利用尿素的微
生物；在培养基中加入青霉素可分离得到酵母菌和霉菌。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基配方
培养基组成 提供的营养或作用
KH2PO4 1.4 g、Na2HPO4 2.1 g、
MgSO4·7H2O 0.2 g
无机盐
葡萄糖 10.0 g 碳源
尿素 1.0 g 氮源、碳源
琼脂 15.0 g 凝固剂
用蒸馏水定容至 1 000 mL 氢元素、氧元素
本培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，
以尿素为氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，会因缺乏氮源
而不能生长繁殖，所以，用该培养基能够筛选出可分解尿素的微生物。
【典题精练 1】 应用选择培养基的主要原理是( )
A．使微生物大量增殖
B．显现某微生物的特征，以区别于其他微生物
C．抑制不需要的微生物的生长
D．适宜野生型微生物的生长
【答案】 C
【解析】 同学们可从选择培养基的作用原理来区分各个选项。
选择培养基是在培养基中加入某一化学物质或改变某一理化性质，
使某一微生物正常生长，而其他微生物则被杀灭或生长受到抑制，从
而选出所需要的微生物。
解题归纳 根据选择培养的菌种的生理代谢特点，加入某种物质或
不加入某种物质以达到选择的目的。常见微生物的分离举例如下。
①酵母菌、霉菌等真菌：用含青霉素的培养基分离；
②金黄色葡萄球菌：用含高浓度食盐水的培养基分离；
③固氮微生物：用缺乏氮源的培养基分离；
④自养型微生物：用含无机碳源的培养基分离；
⑤厌氧型和兼性厌氧型微生物：用普通培养基在无氧条件下分离。
【典题精练 2】 甲、乙、丙是三种微生物，表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用
来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；
甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁
殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是( )
Ⅰ Ⅱ Ⅲ
粉状硫 10 g ＋ ＋ ＋
K2HPO4 4 g ＋ ＋ ＋
FeSO4 0.5 g ＋ ＋ ＋
蔗糖 10 g ＋ － ＋
(NH4)2SO4 0.4 g － ＋ ＋
H2O 100 mL ＋ ＋ ＋
MgSO4 9.25 g ＋ ＋ ＋
CaCl2 0.5 g ＋ ＋ ＋
注：“＋”表示培养基中加入了这种物质，“－”表示培养基中
没有加入这种物质。
A．甲、乙、丙都是异养型微生物
B．甲、乙都是自养型微生物，丙是异养型微生物
C．甲是异养型微生物，乙是固氮微生物，丙是自养型微生物
D．甲是固氮微生物，乙是自养型微生物，丙是异养型微生物
【答案】 D
【解析】 Ⅰ培养基缺少氮源，Ⅱ培养基缺少碳源，Ⅲ培养基营
养全面。氮元素是微生物生长的必需元素，每一种微生物正常生长都
需要氮元素，但自己能够固氮的微生物可以生活在无氮培养基上。甲
能在Ⅰ上正常生长繁殖，而乙、丙都不能，说明甲是能够固氮的微生
物；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，而甲、丙不能，说明乙不需要培养...
知识点一 菌株的筛选与选择培养基
1．筛选菌株
(1)原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、
pH 等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
(2)实例：从热泉中筛选出 Taq 细菌。热泉 70～80 ℃的高温条
件淘汰了绝大多数微生物，而使耐热的 Taq 细菌脱颖而出。
(3)方法：利用选择培养基分离。
归纳总结：选择培养微生物的方法通常有两种：(1)可利用该分离
对象对某一营养物质有“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养
物质，从而使它成为一种加富培养基；(2)可利用该分离对象对某种抑
菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑菌物质，经培养后，其他微
生物生长受抑制，而分离对象却可乘机大大繁殖，在数量上占优势。
2．选择培养基
(1)概念：选择培养基指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或
阻止其他种类微生物生长的培养基。
(2)选择培养基的制备原理：根据不同微生物的特殊营养要求或其
对某一化学、物理因素的抗性不同而制备培养基。
(3)选择培养基的制备方法：在培养基中加入某种允许特定种类微
生物生长，抑制或阻止其他种类微生物生长的化学成分。
(4)选择培养基的用途：使混合菌株中的目的菌变成优势菌，提高
该菌的筛选率。
(5)实例：在培养基中以尿素为唯一的氮源可得到能利用尿素的微
生物；在培养基中加入青霉素可分离得到酵母菌和霉菌。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基配方
培养基组成 提供的营养或作用
KH2PO4 1.4 g、Na2HPO4 2.1 g、
MgSO4·7H2O 0.2 g
无机盐
葡萄糖 10.0 g 碳源
尿素 1.0 g 氮源、碳源
琼脂 15.0 g 凝固剂
用蒸馏水定容至 1 000 mL 氢元素、氧元素
本培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，
以尿素为氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，会因缺乏氮源
而不能生长繁殖，所以，用该培养基能够筛选出可分解尿素的微生物。
【典题精练 1】 应用选择培养基的主要原理是( )
A．使微生物大量增殖
B．显现某微生物的特征，以区别于其他微生物
C．抑制不需要的微生物的生长
D．适宜野生型微生物的生长
【答案】 C
【解析】 同学们可从选择培养基的作用原理来区分各个选项。
选择培养基是在培养基中加入某一化学物质或改变某一理化性质，
使某一微生物正常生长，而其他微生物则被杀灭或生长受到抑制，从
而选出所需要的微生物。
解题归纳 根据选择培养的菌种的生理代谢特点，加入某种物质或
不加入某种物质以达到选择的目的。常见微生物的分离举例如下。
①酵母菌、霉菌等真菌：用含青霉素的培养基分离；
②金黄色葡萄球菌：用含高浓度食盐水的培养基分离；
③固氮微生物：用缺乏氮源的培养基分离；
④自养型微生物：用含无机碳源的培养基分离；
⑤厌氧型和兼性厌氧型微生物：用普通培养基在无氧条件下分离。
【典题精练 2】 甲、乙、丙是三种微生物，表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用
来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；
甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁
殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是( )
Ⅰ Ⅱ Ⅲ
粉状硫 10 g ＋ ＋ ＋
K2HPO4 4 g ＋ ＋ ＋
FeSO4 0.5 g ＋ ＋ ＋
蔗糖 10 g ＋ － ＋
(NH4)2SO4 0.4 g － ＋ ＋
H2O 100 mL ＋ ＋ ＋
MgSO4 9.25 g ＋ ＋ ＋
CaCl2 0.5 g ＋ ＋ ＋
注：“＋”表示培养基中加入了这种物质，“－”表示培养基中
没有加入这种物质。
A．甲、乙、丙都是异养型微生物
B．甲、乙都是自养型微生物，丙是异养型微生物
C．甲是异养型微生物，乙是固氮微生物，丙是自养型微生物
D．甲是固氮微生物，乙是自养型微生物，丙是异养型微生物
【答案】 D
【解析】 Ⅰ培养基缺少氮源，Ⅱ培养基缺少碳源，Ⅲ培养基营
养全面。氮元素是微生物生长的必需元素，每一种微生物正常生长都
需要氮元素，但自己能够固氮的微生物可以生活在无氮培养基上。甲
能在Ⅰ上正常生长繁殖，而乙、丙都不能，说明甲是能够固氮的微生
物；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，而甲、丙不能，说明乙不需要培养...